Dinámica de proteólisis ruminal en muestras de forraje conservadas a bajas temperaturas

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Autor:Carmona U., Javier H.

Institución:Universidad Católica de Chile. Fac. de Agronomía e Ingeniería Forestal

La conservación de muestras de forraje en laboratorio implica generalmente congelación a temperaturas cercanas a -20 grados C, las cuales pueden alterar las estructuras de las proteínas y provocar cambios en la dinámica de proteólisis ruminal. El propósito de este trabajo fue evaluar el efecto producido por la conservación de muestras de forraje a bajas temperaturas y el uso de un crioprotector (glicerol, etilenglicol, dimetil sulfoxido y sacarosa) sobre la actividad enzimática in vitro de la microflora ruminal, los daños en la membrana celular y los cambios en el perfil nitrogenado de las muestras conservadas. Se utilizo como sustratos dos gramíneas (Avena sativa cv. Nehuen, Bromus sp. y Festuca arundinacea cv. Fawn) y dos leguminosas (Medicago sativa cv. ZC9364 y Trifolium repens cv. Kopu). Para estudiar si la solución crioprotectora inhibe la actividad enzimática de la microflora ruminal, se estudio la degradación de la pared celular y de los compuestos nitrogenados asociados a la misma en muestras que fueron inmersas en una mezcla de crioprotectores (Tratamiento C/CP), en agua destilada (Tratamiento S/CP) y agente criopreservante lavado (Tratamiento CP/Lv). Estas muestras fueron incubadas en un medio ruminal durante 6, 12, 24 y 48 horas. Los resultados mostraron que la actividad enzimática de la microflora ruminal no se ve afectada hasta las 6h de incubación con el tratamiento CP/Lv, mientras que si hubieron diferencias negativas y significativas entre los tres tratamientos a partir de las 24h de incubación en las cuatro especies ensayadas (p<0.05). Un segundo ensayo se realizo con el fin de determinar el daño en la membrana celular y la estabilidad de los compuestos nitrogenados en muestras conservadas por 10 días a 4 grados, -20 grados, -80 grados y -80 grados C previa inmersión en nitrógeno liquido, en ausencia o presencia de una mezcla de crioprotectores y sometidas a una incubación ruminal por 6 horas. No existió interacción entre los factores ensayados (p<0.05) y los resultados mostraron que al comparar la conservación a -20 grados con -80 grados C previa inmersión en N2L el contenido de NSDN disminuyó de 76 a 63% sin uso de crioprotector y de 69 a 58% con uso de crioproteservantes. La lipoperoxidacion de membranas disminuyó de 49 a 35 Nmol/gMS y de 43 a 33 Nmol/gMS bajo las mismas circunstancias. Un tercer ensayo fue realizado con el fin de estudiar el efecto del congelamiento rápido con N2L de muestras posteriormente conservadas a 4, -20 grados, -32 grados y -80 grados C sobre los mismos parámetros que el ensayo anterior. No existió interacción de factores y el efecto velocidad de congelación fue no significativo (p<0.05). Al comparar la conservación a -20 grados y -80 grados C el contenido de NSDN disminuyo de 77 a 64% y la lipoperoxidación de membranas de 41 a 30 Nmol/gMS bajo las mismas temperaturas de conservación. Los resultados de los ensayos realizados confirman que el uso de crioprotector es una manera efectiva de proteger contra el daño por congelación en todas las temperaturas ensayadas, sin embargo la conservación a -20 grados C corresponde a la temperatura que mayores alteraciones genero en el perfil nitrogenado de las muestras ensayadas

Enlace:https://biblioteca.inia.cl/handle/123456789/36628

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Carmona U., Javier H. (2005) Dinámica de proteólisis ruminal en muestras de forraje conservadas a bajas temperaturas [en línea]. Santiago: Disponible en: https://biblioteca.inia.cl/handle/123456789/36628 (Consultado: ).
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