Establecimiento de protocolo de transformación de arándanos mediante Agrobacterium tumefaciens

Autor:Gutiérrez B., Florencia

Institución:Universidad Católica de Chile. Fac. de Agronomía e Ingeniería Forestal

Las heladas primaverales perjudican la producción de Vaccinium corymbosum, especialmente de cultivares tempranos como O'Neal. Se busca solucionar este problema por medio de transgénica, como metodología complementaria a mejoramiento convencional, incorporando el factor de transcripción CBF3 que ha demostrado otorgar resistencia a bajas temperaturas en otras especies. Para esto, se estableció un protocolo de regeneración in vitro de O'Neal, usando medio basal de sales WPM Phyto Technologies (2,4 gL1), vitaminas MS Phyto Technologies (1 ml L-1), sacarosa 7 gL-1, pH 5.2 a 5.4 y Gelrite 3.8 gL-1. Se evaluaron reguladores de crecimiento, como 2iP, zeatina e IBA. Se obtuvo que zeatina (2 mgL-1) fue el mas eficiente en regeneración de brotes a partir de segmentos nodales, dando mayor numero y largo de brotes; e IBA (3 mgL-1) favoreció enraizamiento. Se elaboro una construcción 35S:CBF3, con gen de resistencia a higromicina como seleccionador, la cual se introdujo en Agrobacterium tumefaciens. Se establecido una curva de resistencia endógena de O'Neal a higromicina, determinándose que con una concentración de 2 mgL-1 se podían seleccionar transgénicas. Por ultimo, se efectuaron 10 eventos de transformación de O'Neal, independientes y con variaciones, con la construcción elaborada. Sin embrago, no fue posible la identificación molecular de plántulas transgénicas por medio de PCR

Enlace:https://biblioteca.inia.cl/handle/123456789/57622

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Gutiérrez B., Florencia (2010) Establecimiento de protocolo de transformación de arándanos mediante Agrobacterium tumefaciens [en línea]. Santiago: Disponible en: https://biblioteca.inia.cl/handle/123456789/57622 (Consultado: ).